营养剥夺诱导的脂肪细胞自噬及与Beclin1的关系

摘要：

目的 探讨3T3-L1脂肪细胞在营养剥夺状态下自噬的发生及自噬相关基因Beclin1的变化.方法 培养3T3-L1脂肪细胞至不同诱导分化时期,对照组不做特别处理,营养剥夺组以Hanks液代替细胞完全培养液3 h,形成营养剥夺状态.采用透射电镜观察自噬体；转染携带微管相关蛋白1轻链3(LC3)的绿色荧光蛋白慢病毒(LC3-GFP-LENTIVIRAL)质粒系统,病毒扩增后感染3T3-L1靶细胞,荧光显微镜下观察LC3-GFP点状聚集；蛋白免疫印迹分析检测自噬抗体LC3以及Beclin1的变化；双荧光素酶报告基因检测Beclin1基因转录区(Promoter)及3＇非编码区(3′UTR)的变化.结果 营养剥夺组自噬体数量较对照组增多；营养剥夺组较对照组LC3-GFP点状聚集增多；营养剥夺组LC3-Ⅱ、Beclin1蛋白表达较对照组升高；与对照组相比,营养剥夺组Beclin1-Promoter及Beclin1-3＇UTR相对荧光单位呈倍数增高,差别有统计学意义(P＜0.01).结论 营养剥夺可以诱导3T3-L1脂肪细胞发生自噬；营养剥夺诱导的自噬与Beclin1相关,可同时影响Beclin1基因的转录与mRNA稳定性.

关键词：营养剥夺、3T3-L1脂肪细胞、自噬、Beclin1

所属期刊栏目：28

分类号：R589(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：国家自然科学基金30971387

在线出版日期：2011-12-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：410-413,417