大鼠肝再生相关基因Tax1bp1与绿色荧光蛋白融合表达的研究

摘要：

目的 构建大鼠肝再生相关基因Tax1bp1的真核表达载体,融合绿色荧光蛋白并在再生肝中高效表达,观察目的蛋白的表达情况.方法 利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术以大鼠再生肝为材料克隆Tax1bp1基因的开放阅读框(ORF),然后亚克隆到表达载体上构建重组表达载体pEGFP-N1-Tax1bp1,再用尾静脉液压法转入大鼠再生肝中进行绿色荧光蛋白融合表达.结果 Tax1bp1ORF克隆正确,融合绿色荧光蛋白重组表达载体pEGFP-N1-Tax1bp1构建成功;部分肝切除转基因6、12、24、48 h后均有荧光表达,Tax1bp1融合蛋白在上述时间点绿色荧光融合蛋白细胞转染率分别为8.7%、11.2%、14.5%和1.2%,转染率趋势同空载体绿色荧光蛋白表达情况一致.结论 重组表达载体pEGFP-N1-Tax1bp1构建成功,并实现了绿色荧光融合蛋白的高效表达,为进一步研究肝再生相关Tax1bp1基因功能奠定了基础.

关键词：大鼠、Tax1bp1、cDNA克隆、融合表达

所属期刊栏目：28

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：河南省基础与前沿计划项目102300413213;河南师范大学生命科学实验教学中心创新项目200916

在线出版日期：2011-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：285-287,290