大肠埃希菌感染对U937细胞凋亡的影响及机制探讨
目的 探讨大肠埃希菌(E.coli)感染对人巨噬细胞系U937细胞的促凋亡作用及其机制.方法 调整U937细胞与E.coli浓度比为1:20时,放入培养基中培养0、10、20、30、60和90 min,获得感染的U937细胞.采用流式细胞仪检测不同感染时间U937细胞的细胞凋亡率,Western blot法检测U937细胞胞浆内第2线粒体激活剂(Smac)和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的表达水平.在E.coli感染前60 min用浓度0、10、20和40 μmol·L-1的Embelin预处理U937细胞,然后在E.coli诱导U937细胞凋亡30 min后收集细胞,用Annexin V FITC/PI双染后用流式细胞仪分析U937细胞的凋亡情况.结果 当U937细胞E.coli浓度比为1:20时,感染0、10、20、30、60和90 min时U937细胞凋亡率分别为(3.02±0.78)%、(6.67±1.34)%、(10.56±1.02)%、(33.92±2.66)%、(46.98±3.12)%和(69.02±4.69)%,呈时间依赖性.U937细胞感染E.coli后发生凋亡,并且凋亡率随着E.coli感染时间的延长而升高.Smac的表达随着E.coli感染时间的延长逐渐升高,XIAP的表达则随着感染时间的延长而逐渐降低,而且不同感染时间组比较差别有统计学意义(P<0.05).加入XIAP的抑制剂Embelin后,U937细胞的凋亡率随着Embelin的浓度增加而逐渐升高(P<0.05).结论 人巨噬细胞系U937细胞感染E.coli后发生凋亡,其凋亡的发生与影响Smac和XIAP的表达有关.Embelin通过特异性地抑制XIAP表达,增加E.coli诱导的U937细胞凋亡率.
大肠埃希菌、U937细胞、细胞凋亡、第2线粒体激活剂、X连锁凋亡抑制蛋白
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R378.1(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
辽宁省教育厅高等学校科研计划项目L2010701
2011-08-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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