氯通道阻断剂5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸在内皮素-1对体外培养牛角膜内皮细胞增殖中的影响
目的 观察氯通道阻断剂5-硝基-2(3-苯丙胺)苯甲酸(NPPB)在内皮素-1(ET-1)对体外培养牛角膜内皮细胞增殖中的作用.方法 实验设7组,对照组、1 g·L-1二甲基哑砜(DMSO)组、200 pmol·L-1 ET-1组、200 pmol·L-1ET-1+1 g·L-1DMSO组和200 pmol·L-1ET-1+50、100、200 μmol·L-1NPPB 3个实验组.采用倒置光学显微镜观察牛角膜内皮细胞形态.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析法观察细胞增殖,计算细胞存活率.采用免疫细胞化学检测细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达,并采用计算机图像分析测定平均光吸收值.应用流式细胞仪检测细胞周期时相的变化,计算细胞增殖指数.结果 NPPB能够使细胞形态发生异常,细胞内分裂相减少.50、100 μmol·L-1NPPB使培养牛角膜内皮细胞MTT光吸收值、细胞存活率和PCNA阳性细胞的平均光吸收值较200 pmol·L-1ET-1组均显著降低,并具有浓度依赖性.而NPPB浓度达到200 μmol·L-1时,细胞趋于死亡.经100 μmol·L-1的NPPB处理后,与对照组和200 pmol·L-1ET-1组相比,出现明显的凋亡峰,G1期细胞比例明显增高,S期及G2/M期细胞比例则明显降低,增殖指数明显下降.结论 NPPB浓度依赖性抑制ET-1对培养BCECs的增殖作用,使细胞周期停滞在G1期.
内皮素-1、5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸、氯通道、增殖、牛、角膜内皮细胞
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R965(药理学)
国家自然科学基金资助项目30801260
2011-01-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
541-545