10.3969/j.issn.1004-7239.2007.05.001
雷帕霉素对大鼠血管平滑肌细胞起始识别复合物1 mRNA表达的影响
目的 观察血管平滑肌细胞(VSMC)起始识别复合物1(ORC1) mRNA在雷帕霉素作用下的表达变化.方法 采用组织块贴壁法获得VSMC并用免疫细胞化学法鉴定,含体积分数10%血清的培养基培养.血清饥饿法饥饿细胞24 h使其同步化.将雷帕霉素加入含体积分数10%血清的培养基(终浓度为10 nmol·L-1)中继续培养细胞,分别于0 h、3 h、6 h、9 h、12 h、15 h、18 h、21 h、24 h收集细胞,采用反转录-聚合酶链反应技术法检测各时间点ORC1 mRNA的表达(内参为β-actin).用Quantity One 软件计算各时间点ORC1 mRNA与内参的光密度比值,并作统计学分析.结果 各时间点ORC1与β-actin光密度比值均有显著性差异(F=410.170,P=0.001).雷帕霉素作用3~12 h ORC1 mRNA的表达持续升高(与0 h比较,P<0.05),12~18 h逐渐下降(与0 h比较,P依次为0.001,0.001,1.000),18~24 h与0 h比较,无统计学差异(P依次为1.000,0.986,1.000).结论 VSMC的ORC1 mRNA表达随雷帕霉素作用时间呈动态变化.
起始识别复合物、雷帕霉素、血管平滑肌细胞、大鼠
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R322.12(人体形态学)
国家自然科学基金30470727
2007-10-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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