常氏肝癌细胞cDNA文库的构建及质量分析

摘要：

目的利用RNA转录5′末端转换机制(SMART)构建适合免疫筛选的经去分化培养基处理的常氏肝癌细胞cDNA文库.方法通过反转录PCR和长距离PCR获得常氏肝癌细胞的全长cDNA,然后利用SMART cDNA文库构建试剂盒建立经去分化培养基处理的常氏肝癌细胞cDNA文库.结果通过测定,高质量的包含常氏肝癌细胞全长cDNA的cDNA文库得到建立,扩增cDNA文库的滴度高达4.5 × 1010 pfu*ml-1,重组子内平均插入外源基因片段长度在200 bp到4000 bp之间,约1500 bp左右,并且此文库适合免疫筛选.结论结果显示所构建的经去分化培养基处理的常氏肝癌细胞cDNA文库具有很高的质量, 为进一步研究常氏肝癌细胞和筛选相关基因获得cDNA全长奠定了坚实的基础.

关键词：cDNA文库、RNA转录5′末端转换机制、常氏肝癌细胞、长距离PCR、免疫筛选

所属期刊栏目：21

分类号：Q523(核酸)

资助基金：foundation of Henan key-stackle S & T project0122031900

在线出版日期：2004-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1-4