人脐带血间充质干细胞移植对急性心肌梗死大鼠心功能的影响

摘要：

目的 研究脐带血来源的问充质干细胞(mesenchymal stern cells,MSCs)体外分离、纯化及培养的条件,以建立稳定的体外培养体系,满足实验和临床的需要;探讨经尾静脉移植脐血间充质干细胞对心肌梗死大鼠心功能的影响.方法 无菌条件下采集健康育龄产妇正常分娩胎儿的脐带血42份,脐血随机分成3组:FBS(胎牛血清)未包被组、FBS包被组和mesencult培养基组.FBS未包被组和FBS包被组均使用含10%FBS的LG-DMEM培养基、mesencult培养基组使用专用来培养干细胞的mesencult培养基,与其添加物配合使用.3组均用Ficoll淋巴细胞分离液,密度梯度法分离脐血单个核细胞(MNC),将单个核细胞按密度1×108/ml接种于T25培养瓶中,置37°C饱和湿度含5%CO2孵育箱培养,72h后全量换液,去除未贴壁细胞,以后均7d换液1次.待细胞长到80%铺满瓶底时结束原代培养.按1:1进行消化传代.观察不同培养条件对脐血MSCs生长的影响.取P2代细胞用流式细胞仪检测细胞表面CD 29、CD 34、CD45、CD 105标志.将36只SD大鼠随机分成MSCs移植组、假手术组和心肌梗死植组各12只,结扎左冠状动脉前降支制备大鼠心肌梗死模型.心肌梗死后1周,经尾静脉注射脐血MSCs,4周后测定大鼠血流动力学.结果 42份脐血中单个核细胞原代培养,其中仅8份传代培养成功,而其中mesencult条件培养基有5份培养成功,明显高于FBS包被组(3份)和FBs未包被组(0份).流式细胞仪检测第2代的脐血MSCs结果显示,P2代MSCs不表达或极弱表达CD 34,CD45造血细胞标志,稳定地高表达CD 29、CD 105间允质细胞相关的表面抗原标记.这与骨髓MSCs的表面抗原标志相一致.移植后4周,经血流动力学检测,与心梗组比较,MSCs移植组左室心功能明显改善(P＜O.05).结论 将脐血单个核细胞以高密度(1×108＞cells/ml)接种在mesencult堵养基中可以在体外成功培养出较纯化的脐血MSCs,其培养成功率较高.脐血MSCs的免疫表型符合间充质干细胞特征.脐血MSCs移植能促进心梗大鼠心功能恢复.

关键词：心肌梗死、脐带血、间充质干细胞、移植

所属期刊栏目：16

分类号：R542.2(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：广东省科技计划资助课题2009BO30801358

在线出版日期：2011-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：244-249