大鼠心肌干细胞的体外分离培养

摘要：

目的 自大鼠心脏中分离得到心肌干细胞,体外培养并观察其向心肌细胞的分化能力.方法 无菌操作取下新生鼠心脏,经反复消化后,弃去消化液,将所得残余组织块进行培养,视生长情况进行传代(一般1周左右).传代细胞采用不同培养液进行培养,约2周后,镜下可见搏动细胞时,分别对原代细胞和传代细胞进行流式细胞鉴定及免疫组化染色.结果 从消化后残留心肌组织块中成功培养出原代细胞,经流式细胞仪鉴定其表型为c-kit,CD 31阳性,CD 34,CD 45、心肌钙蛋白T(Cardiac Troponin T,CTnT)阴性.细胞经传代培养2周后,单个细胞开始出现搏动,亦可见成团细胞的同步收缩.再次流式鉴定的结果,表型有所改变,主要是CD 31转阴性,CTnT阳性,而c-kit、CD 34、CD45无明显变化.免疫组化证实,原代细胞并不表达心肌细胞结构蛋白CTnT,而在部分传代细胞内可见CTnT表达.结论 成功自心脏中分离得到一类表型为c-kit+、CD 31+、CD 34-、CD 45-、CTnT-的细胞,经使用不同成份培养液传代培养,可分化可搏动的心肌细胞,并表达心肌结构蛋白.

关键词：心肌干细胞、分离和培养、流式细胞术、免疫组化

所属期刊栏目：12

分类号：Q25(细胞生理学)

在线出版日期：2006-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：201-205