肿瘤坏死因子对内皮细胞组织因子表达及转录调控的影响

摘要：

目的:研究肿瘤坏死因子(TNFα)对内皮细胞组织因子(TF)表达的影响,并探讨TF基因5′上游序列以及核转录因子NF-κ B在该基因转录中的调控作用.方法:进行人脐静脉内皮细胞株(EVC304)及原代内皮细胞的培养.用发色底物显色法、RT-PCR和细胞原位杂交分别检测内皮细胞TF活性和mRNA水平.采用基因重组技术构建含有人TF基因不同上游序列荧光素酶报告基因质粒,经脂质体法转染内皮细胞,检测及分析报告基因活性.凝胶电泳迁移率改变法和western印迹法检测内皮细胞NF-κ B与DNA结合活性和含量.结果:100 u/ml TNFα诱导内皮细胞TF活性和mRNA表达量明显增高;在TF基因上游序列-244/+121 bp存在时,TNFα可使转染内皮细胞荧光素酶表达量明显增加,-111/+121 bp存在时表达量无明显差异,而且比存在-244/+121 bp时的表达量明显降低;同样浓度TNFα作用下,内皮细胞核抽提物与NF-κ B探针的结合活性高于正常对照组,核内NF-κ B含量明显增加.结论:TNFα可以增强内皮细胞TF活性及基因表达,其中TF基因上游-244/-112 bp序列的存在起着重要的调节作用.此外,TNFα也能促进内皮细胞NF-κ B的转位和与DNA结合活性增高.

关键词：内皮细胞、组织因子、基因表达、核转录因子NF-κB

所属期刊栏目：7

分类号：R329.Q786(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金39730220;杨森科学委员会科研项目

在线出版日期：2004-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：57-61