10.3760/cma.j.cn421158-20220408-00255
IL-33调控Ⅱ型固有淋巴细胞促进脓毒症腹腔巨噬细胞吞噬功能的研究
目的:探讨白细胞介素33 （interleukin-33，IL-33）调控腹腔Ⅱ型固有淋巴细胞（group 2 innate lymphoid cells, ILC2）募集以及ILC2对脓毒症腹腔感染时巨噬细胞的影响，进一步了解腹腔感染的免疫调控机制。方法:选择健康的6~8周雄性C57BL/6野生型小鼠40只、C57BL/6背景的Il-33
-/-小鼠20只、IL-33受体ST2敲除（Il1rl1
-/-）小鼠10只，繁殖并饲养于浙江大学和美国匹兹堡大学的SPF级医学动物中心。采用盲肠结扎穿孔的方法构建脓毒症小鼠模型。接受假手术用来作为对照的小鼠除了不进行盲肠结扎穿孔操作外，其余手术操作和脓毒症小鼠操作完全相同。将盲肠结扎穿孔模型小鼠作为脓毒症组，将假手术操作的小鼠作为对照组。外源性腹腔注射给予IL-33蛋白，流式细胞术检测小鼠腹腔灌洗液中ILC2的变化及其胞内细胞因子水平。运用体外实验证实ILC2分泌的IL-9和IL-13对巨噬细胞吞噬能力的影响。采用
t检验或One-Way ANOVA检验统计分析。
结果:①相较于ILC2在IL-33刺激之前和之后，ILC2在腹腔Lin
-CD45
+细胞中的比例分别为9.90±0.80比18.43±0.46，ILC2受刺激后在腹腔中的比例增加，差异具有统计学意义（
P<0.001），ILC2在腹腔中的数量分别为（5 786.00±289.50）个比（17 820.00±324.30）个，ILC2受刺激后在腹腔中的数量增加，差异具有统计学意义（
P<0.001）。②C57BL/6野生型小鼠在接受构建脓毒症小鼠模型操作24 h后腹腔ILC2募集较对照组显著增多，20.50±0.59比10.83±1.01，差异具有统计学意义（
P=0.001）；Il-33
-/-、Il1rl1
-/-小鼠在接受构建脓毒症小鼠模型操作24 h后腹腔中的ILC2并未增加，而给对照组小鼠腹腔注射重组IL-33蛋白后ILC2的比例比未注射的对照组Il-33
-/-小鼠的ILC2比例显著增多，10.53±0.47比19.43±0.87，差异具有统计学意义（
P<0.001）；给脓毒症组小鼠腹腔注射重组IL-33蛋白后ILC2的比例比未注射的脓毒症Il-33
-/-小鼠的ILC2比例显著增多，10.13±0.57比21.37±0.86，差异具有统计学意义（
P<0.001）。③对腹腔募集的ILC2分泌的细胞因子水平研究显示，构建脓毒症小鼠模型操作后12 h腹腔ILC2分泌IL-9、IL-13的比例显著增加，IL-9在操作前后的分泌比例分别为16.53± 0.74比24.67±1.45，差异具有统计学意义（
P=0.007），IL-13在操作前后的分泌比例分别为15.40± 0.87比29.40±0.95，差异具有统计学意义（
P<0.001），而IL-4的分泌比例为6.14±0.59比5.89± 1.05，差异无统计学意义（
P=0.836）。④通过腹腔注射重组IL-33蛋白发现，IL-33促进CD45
+F4/80
+的巨噬细胞在腹腔中的募集，注射前和注射后的比例分别为52.40±1.70比72.40±2.02，差异具有统计学意义（
P=0.002）。⑤在ILC2分泌的IL-9、IL-13的作用下，脓毒症组巨噬细胞的吞噬能力较对照组显著增加，IL-9作用下巨噬细胞的吞噬能力分别为61.27±1.46比48.30±1.65，差异具有统计学意义（
P=0.004），IL-13作用下巨噬细胞的吞噬能力分别为61.63±2.03比48.30±1.65，差异具有统计学意义（
P=0.007）。
结论:IL-33促进腹腔源性脓毒症时ILC2和巨噬细胞的募集。腹腔ILC2的募集依赖于IL-33/ST2信号通路，脓毒症时分泌细胞因子IL-9和IL-13增多且能够提升巨噬细胞的吞噬功能，从而发挥保护作用。
脓毒症、腹腔、Ⅱ型固有淋巴细胞、白介素33、巨噬细胞
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国家自然科学基金81671956，81901989;浙江省自然科学基金项目LY21H150005 ，LY19H150005;浙江大学紫金计划资助2022-16;National Natural Science Foundation of China81671956, 81901989;Natural Science Foundation of Zhejiang ProvinceLY21H150005, LY19H150005;Foundation of Zhejiang University Zijin Program2022-16
2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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