胆道闭锁患儿来源原代胆管类器官体的初步研究

摘要：

目的:探究原代胆管细胞培养胆道闭锁患儿胆囊来源的胆管类器官体进行实验研究的可行性。方法:选取2017年9月至2018年3月期间在复旦大学附属儿科医院4例Ⅲ型胆道闭锁患儿行Kasai手术及4例胆总管囊肿患儿行胆总管囊肿切除术获得的部分胆囊胆管细胞，采用三维原代胆管细胞培养方法培养胆道闭锁患儿胆囊来源的胆管细胞(实验组)和胆管扩张症(对照组)胆囊来源的胆管细胞类器官体；利用实时荧光定量PCR检测胆管相关的基因表达水平；利用HE染色、免疫荧光染色初步观察类器官体形态与基因表达特点；观察人工合成胆闭素对该胆管类器官体的影响。参数检验采用Student's
t检验、方差分析，非参数检验采用Spearman检验、Kruskal-Wallis检验。
结果:胆道闭锁患儿胆囊来源的胆管细胞和胆管扩张症胆囊来源的胆管细胞均可形成有结构的胆管类器官体，呈现空心球状或管状，均表达胆管标志基因，且两种来源的类器官体在形态和胆管标志基因表达水平上差异无统计学意义。P0、P1、P2代的胆道闭锁来源的胆管细胞的基因表达水平差异无统计学意义，表明胆管类器官体在体外培养时可以长期维持较稳定的基因表达水平。在培养基中加入人工合成的胆闭素后，与对照组相比，胆管类器官体细胞出现明显死亡现象。结论:利用胆道闭锁患儿来源的胆管细胞类器官体研究胆道闭锁的发病机制有一定的科学意义。

关键词：胆道闭锁、原代胆管细胞、类器官体

所属期刊栏目：42

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：506-511