C57BL/6新生小鼠坏死性小肠结肠炎模型改建与评估

摘要：

目的 改建C57BL/6新生小鼠坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)模型,为深入探讨NEC的发病机制提供实验基础.方法 2日龄C57BL/6新生小鼠随机分为NEC模型组(36只)和对照组(11只),NEC模型组给予100％氮气90s+4℃10 min+脂多糖7 mg/kg干预建模,对照组仅予以同等体积生理盐水.比较两组间生长发育、肠道大体及病理差异,荧光定量PCR检测相关基因mRNA变化,免疫组化方法评估肠道细胞迁移和自我更新,免疫荧光检测细胞凋亡和增殖.Nadler标准病理评分≥3分定义为NEC样肠道损伤.结果 NEC模型组24 h之内死亡1只,48 h存活率为81％,72 h存活率为69％.对照组存活率为100％.NEC模型组和对照组实验前体重差异无统计学意义.实验24 h、48 h和72 h,模型组平均体重均显著低于对照组,P＜0.05.模型组新生小鼠活动减少甚者完全静止,对刺激反应欠佳或无反应;而对照组生长发育良好[临床评分:对照组中位数=0(0～1),NEC模型组中位数=7(3～12),P＜0.01].NEC模型组肠道标本表现为全肠段或部分肠段不同程度扩张和肠壁积气,严重者呈串珠样;以回盲部及其近端病变更为严重[肠道评分:对照组中位数=0(0～1);NEC模型组中位数=4(1～6),P＜0.01],镜下肠绒毛病变明显,Nadler标准病理评分≥3分20例,成模率为71％(20/28).与对照组相比,NEC模型组细胞增殖减少(P＜0J.05),细胞凋亡增加(P＜0.05),细胞迁移距离缩短(P＜0.05),炎症相关基因ICAM、CXCL-1、CX-CL-2表达上调,肠道干细胞Lgr5表达下降.结论 本研究成功改建C57BL/6新生小鼠NEC模型,模型简洁高效、稳定可重复,能用于NEC的进一步研究.

关键词：小肠结肠炎、坏死性、小鼠、模型、动物

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资助基金：the Sciense Foundation of Shanghai16ZR1403800上海市自然科学基金16ZR1403800

在线出版日期：2018-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：376-382