IL-2联合IL-15提高肾母细胞瘤患儿外周血NK细胞对肿瘤细胞的杀伤作用

摘要：

目的 观察肾母细胞瘤(WT)患儿外周血NK细胞经IL-2、ILd5扩增后对肾母细胞瘤SK-NEP-1的杀伤作用.方法 以8例WT患儿作为病例组,8例健康体检儿童作为对照组.采集每例外周血4 ml,按Fieoll法分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞仪检测、分选两组PBMC中CD3+ CD16+ CD56+ NK细胞;另采集病例组和对照组外周血4 ml,分离PBMC后,分两组进行培养[IL-2(100 U/ml)培养组、IL-2(100 U/ml)联合IL-15(10 ng/ml)培养组],流式细胞仪检测、分选培养后CD3-CD16+ CD56+ NK细胞.CCK8法检测在不同效靶比(E∶T分别为5∶1、10∶1、20∶1)(效应细胞:NK细胞;靶细胞:SK-NEP-1)情况下,WT患儿外周血NK细胞经IL-2、IL-15扩增后对SK-NEP-1细胞的杀伤作用.western blot检测培养前、IL-2培养组、IL-2联合IL-15组CD3-、CD16+、CD56+、NK细胞中TNF-α及TNF-β表达情况.结果 病例组和对照组采用IL-2联合IL-15扩增后的NK细胞比例分别增加[(7.3±2.4)％比(21.2±3.2)％],[(4.5±1.6)％比(10.1±3.4)％];数量分别增多(70.60±22.5),(30.12±33.16)倍,(P＜0.05).E∶T为10∶1、20∶1时,与单用IL-2扩增比较,IL-2联合IL-15扩增组的NK细胞对肾母细胞瘤细胞的杀伤作用均增强[(16.3±2.1)比(10.5±1.6)]、[(23.9±3.2)比(13.7±2.5)],(P＜0.05).病例组患儿外周血CD3 CD16+ CD56+ NK细胞采用IL-2联合IL-15培养后TNF-α和TNF-β的表达量,较IL-2组、培养前,均显著增加(P＜0.05).结论 IL-2联合IL-15能够提高患儿外周血NK细胞的比例及数量,增加其分泌TNF的能力,从而提高其对肿瘤的杀伤作用.

关键词：肾母细胞瘤、自然杀伤性细胞、白细胞介素2、白介素15、儿童

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资助基金：National Clinical Key Specialty Foundation of China [2013544]国家级临床重点专科项目2013544

在线出版日期：2018-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：345-350