miR-93对神经母细胞瘤细胞侵袭和迁移的影响及机制研究

摘要：

目的 研究miR-93对神经母细胞瘤细胞侵袭和迁移能力的影响及可能的分子机制.方法 收集13例确诊的神经母细胞瘤患儿原发部位和转移部位组织样本,利用实时定量PCR的方法检测样本中miR-93的表达水平.在神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y和SH-N-SH细胞中转染miR-93 mimic,转染24 h后利用实时定量PCR技术检测SH-SY5Y和SH-N-SH中miR-93的表达水平.利用Transwell侵袭实验检测过表达miR-93后对细胞侵袭能力的影响.利用体外划痕实验检测过表达miR-93对细胞迁移能力的影响.利用Western blot方法检测过表达miR-93 mimic后SH-SY5Y和SH-N-SH细胞中MYCN蛋白表达水平.在Targetscan中找出可能与miR-93作用的MYCN的3'UTR序列,设计合成野生型与突变型MYCN的3'UTR的PCR引物,构建野生型与突变型荧光素酶报告载体,用X-tremeGENE将荧光素酶报告载体分别与miR-93 mimic共转染到SH-SY5Y细胞中,用双荧光素酶检测试剂盒检测荧光素酶活性,验证miR-93对MYCN的靶向调控作用.结果 与原发性神经母细胞瘤相比,miR-93在转移瘤中表达显著降低.过表达miR-93后SH-SY5Y和SH-N-SH细胞侵袭和迁移能力显著降低.过表达miR-93后,SH-SY5Y和SH-N-SH细胞内MYCN蛋白表达下调.荧光素酶活性检测表明miR-93能够抑制MYCN的荧光素酶活性.结论 MiR-93能够通过负调控MYCN而抑制神经母细胞瘤细胞侵袭和迁移能力.

关键词：神经母细胞瘤、肿瘤转移、荧光素

所属期刊栏目：36

分类号：R737.9;R3;Q789

资助基金：国家自然科学基金;山东省自然科学基金重点项目;山东省教育厅项目

在线出版日期：2016-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：930-935