应用SELDI-TOF-MS技术筛选输尿管部分梗阻大鼠血清生物学标志物的初步研究

摘要：

目的 应用表面增强激光解析电离-飞行时间质谱(surface enhanced laser desorption/ionization-time offlight-mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术,检测正常大鼠和输尿管部分梗阻(partial unilateral ureteral obstruction,PUUO)肾小管上皮细胞转化前后的大鼠血清,筛选出一组特异性标志物,为先天性肾积水及梗阻性肾病选择适宜的手术及治疗时机提供依据.方法 PUUO组大鼠(n=48)随机数字表法分为梗阻12h、1d、2d、3d、5d、7d等6个时间段组,每组8只;空白对照组(n=30).制作PUUO模型,于不同时间点分别处死大鼠,分别取双侧肾脏制作石蜡切片、腹主动脉穿刺获取血清,-80℃保存.应用免疫荧光双标方法确定动物模型中肾小管上皮细胞发生上皮间质转化的时间点,选取动物模型肾小管上皮细胞转化前后收集的血清标本,利用SELDI-TOF-MS技术筛选出大鼠血清中肾小管上皮细胞间质转化前后的标志物.结果 大鼠PUUO术后3d即有肾小管上皮细胞表达成纤维细胞标志物,发生细胞表型转化,即发生上皮间质转化,随梗阻时间延长,肾脏中发生转化的肾小管上皮细胞逐渐增多.发现PUUO大鼠血清中有27种蛋白质标记物,其中10种蛋白质高表达,17种蛋白质低表达.结论 大鼠PUUO模型的手术侧肾脏可用于研究肾间质纤维化.大鼠肾间质纤维化过程中肾小管上皮细胞存在上皮间质转化现象.应用SELDI-TOF-MS技术筛查出PUUO前后大鼠血清的差异蛋白峰可能是PUUO大鼠血清的特异性蛋白质标志物.

关键词：输尿管梗阻、肾小管、上皮细胞、血清

所属期刊栏目：36

分类号：R734.2;R692;R587.2

资助基金：国家自然科学基金;辽宁省科技厅科技项目

在线出版日期：2015-12-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：675-680