丁酸钠对Caco-2细胞增殖与凋亡的影响

摘要：

目的 观察丁酸钠及p38MAPK特异性抑制剂SB203580对Caco-2细胞的作用情况,探索短链脂肪酸损害肠上皮屏障的可能机制,进而为防治新生儿坏死性小肠结肠炎寻找新靶点提供依据.方法 使用不同浓度丁酸钠和SB203580作用于体外培养的Caco-2细胞及单层Caco-2细胞肠屏障模型,通过Cell Counting Kit(CCK-8)法检测细胞活性变化;通过Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪术与吖啶橙(Acridine Orange,AO)荧光染色检测与观察细胞凋亡情况;应用Western Blot法检测细胞内p38MAPK、p-p38MAPK的表达.结果 ①低浓度丁酸钠组(2 mmol/L)作用Caco-2细胞72 h,CCK-8的吸光度为0.78±0.049,较对照组的0.97±0.016吸光度要低(P＜0.01);②AO凋亡核染发现5 mmol/L丁酸钠作用Caco-2细胞72 h,出现典型的凋亡细胞核形态学变化;③2 mmol/L丁酸钠组作用Caco-2细胞72 h,细胞凋亡率为(14±3.21)％,与对照组的(13.77±4.92)％相比差异无统计学意义(P＞0.05);而中、高浓度丁酸钠(5 mmol/L和8mmol/L)诱导的细胞凋亡率分别为(46.96±7.28)％和(71.97±6.65)％,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01),SB203580可降低5 mmol/L丁酸钠组的凋亡率.5 mmol/L丁酸钠作用Caco-2细胞24 h后,细胞凋亡率为(9.54±3.29)％,与对照组的(9.72±2.72)％凋亡率相比差异无统计学意义(P＞0.05);作用48 h和72 h后的Caco-2细胞凋亡率分别为(26.75±3.89)％和(48.33±7.08)％,两者凋亡率均比对照组高(P＜0.01);④丁酸钠以时间和浓度依赖方式激活p38MAPK,SB203580可抑制5 mmol/L丁酸钠刺激后细胞内p-p38MAPK的表达,细胞内p38MAPK及β-Tubulin表达不受作用时间和干预药物浓度的影响.结论 中、高浓度丁酸钠通过诱导大量Caco-2细胞凋亡来破坏单层Caco-2细胞肠屏障功能,在该过程中p38MAPK可能起重要作用.

关键词：脂肪酸类、挥发性、肠黏膜、丝裂原激活蛋白激酶类

所属期刊栏目：36

分类号：R737.9;R2;R373.2

资助基金：浙江省自然科学基金;浙江省医药卫生支撑学科基金;浙江省高校重中之重学科临床医学儿科学开放基金

在线出版日期：2015-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：121-126