输尿管梗阻肾脏差异蛋白质的筛选和鉴定

摘要：

目的 筛选输尿管完全梗阻(complete unilateral ureteral obstruction,CUUO)后不同时间点大鼠肾脏的差异蛋白质,并检测部分差异蛋白在输尿管梗阻大鼠肾脏及儿童先天性肾积水肾脏中的表达.方法 应用双向电泳及质谱分析技术,检测2个月龄SD大鼠CUUO后12h、24 h、72 h以及对照组四组肾脏组织差异蛋白质的表达.应用蛋白质印迹(Western blot)方法检测筛查出的差异蛋白质ANXA4和ETFB在CUUO组和正常对照组大鼠肾脏组织以及15例肾积水患儿肾脏组织及15例肾胚瘤患儿瘤旁正常肾脏组织中的表达.结果 69个表达量相差2倍以上的差异蛋白质点,经质谱分析和蛋白质数据库检索成功鉴定出39个蛋白质,涉及细胞凋亡、线粒体能量代谢及线粒体损伤、氧化应激等方面.在动物模型中ANXA4的表达随梗阻时间延长呈持续上调:CUUO12 h为0.7809±0.036,CUUO24 h为0.9385±0.013,CUUO72 h为1.0218±0.032,Sham为0.7058±0.009,组间差异有统计学意义(P＜0.05);随梗阻时间的延长ETFB的表达逐渐下调:CUUO12h为0.9301±0.017,CUUO24h为0.6488±0.021,CUUO72 h为0.5452±0.018,组间差异有有统计学意义(P＜0.05),而在CUUO72h组和正常对照组表达无明显差异(CUUO72 h 0.5452±0.018比Sham0.5419±0.035,P＞0.05).在肾积水患儿肾脏组织中这两种蛋白的表达均显著上调(ETFB:积水组0.9322±0.014比对照组0.8325±0.012,ANXA4:积水组1.100±0.018比对照组0.8815±0.007P＜0.05).结论 运用双向电泳技术结合质谱分析及生物功能信息分析筛选并鉴定出39个在CUUO大鼠肾脏中差异表达的蛋白质,这些蛋白质可能与梗阻性肾病的发生、发展有关.其中ANXA4和ETFB可能在梗阻性肾病的发生、发展过程中发挥作用.

关键词：输尿管梗阻、蛋白质组、肾盂积水、大鼠

所属期刊栏目：35

分类号：R692.2;S826;Q532.2

资助基金：辽宁省科技计划;国家自然科学基金

在线出版日期：2014-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：853-858