bFGF联合EGF对人肠神经嵴前体细胞增殖及分化能力的影响

摘要：

目的 观察表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人肠神经嵴前体细胞(hENCP)在体外增殖和分化能力的影响,对人ENCP的体外分离培养、传代以及分化特点等基础研究进行探索,为巨结肠患儿自体细胞移植治疗提供实验依据.方法 收集胎龄＞8周非药物流产胎儿,消化后制成单细胞悬液,体外培养3、5、7d后分别观察hENCP在不同生长因子作用下形成的克隆球数量、体积.MTT法观察hENCP在1周内OD值变化曲线.荧光免疫组织化学法p75NTR(鉴定hENCP)、peripherin(鉴定肠神经元)、GFAP(鉴定胶质细胞)抗体染色.结果 能够从胎儿肠壁分离出少量细胞,经体外培养增殖形成克隆球.bFGF联合EGF培养下hENCP的克隆球数量、体积在各个时间点均明显大于单独添加EGF (P＜0.01)或bFGF培养的克隆球(P＜0.01).bFGF+ EGF联合培养的hENCP OD值在各时间点均高于其他各组.克隆球中含有p75NTR免疫阳性细胞(hENCP),并在体外血清诱导下可分化为peripherin免疫阳性细胞(肠神经元)、GFAP免疫阳性细胞(神经胶质细胞).bFGF组分化为神经元的百分率明显高于其他各组(P＜0.01),EGF组分化为神经胶质细胞的百分率明显高于其他各组(P＜0.01).结论 人胚肠壁中存在具有自我更新能力的ENCP,其在体外可分化为神经元和神经胶质细胞.EGF+ bFGF对hENCP有明显的促进增殖作用,bFGF、EGF对体外定向诱导hENCP分化细胞类型具有不同促进作用.

关键词：先天性巨结肠、细胞移植、神经嵴

所属期刊栏目：35

分类号：R741;R373.9;R285

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2014-09-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：509-513