10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2014.04.012
miRNA-101在幼鼠梗阻肾脏中的表达及其与肾间质纤维化的相关性研究
目的 探讨幼鼠单侧输尿管完全梗阻(complete unilateral ureteral obstruction,CUUO)肾脏miRNA-101表达与肾间质纤维化进展的关系.方法 选取30只SD雄性幼鼠,年龄(8±1)周,体重(180±20)g,数字随机分为sham组、CUUO 7 d组和14d组.分别于梗阻后7d和14d处死取其梗阻侧肾脏,将其切开分为均等的两部分,一部分用于RT-PCR,采用相对定量法检测不同梗阻时间段梗阻侧肾脏中miRNA-101表达.另一部分用于Western blot及免疫组织化学检测α-SMA、E-cadherin的相对定量及定性表达.结果 免疫组织化学测定结果显示α-SMA及E-cadherin主要表达于肾间质,呈棕黄色,其中α-SMA和E-cadherin在CUUO 14 d组、UUO 7 d组及sham组显色依次递减和增强;组织学上可见CUUO 7 d组及14d组肾小管管腔增大,明显不同于sham组.RT-PCR结果显示miRNA-101相对表达量(fold difference) sham组是CUUO 14 d组的(14.50±5.12)倍,CUUO7d组是14d组的(3.45±2.27)倍,三组间差异有统计学意义(P<0.05);Western blot显示梗阻侧肾脏α-SMA在CUUO 14 d组、CUUO 7 d和sham表达分别为1.22±0.48、0.50±0.06和0.21±0.03,与相应时间段miRNA-101表达成负相关(r=-0.74,P<0.05).相反,E-cadherin在CUUO 14 d组、CUUO 7 d和sham表达分别为0.24±0.22、0.50±0.44和0.76±0.20.与相应时间段miRNA-101表达成正相关(r=0.88,P<0.05).结论 幼鼠完全梗阻肾脏miRNA-101表达随着梗阻时间的延长而下降,与反映肾脏间质纤维化严重程度的蛋白表达相关,提示miRNA-101的变化可能参与梗阻肾脏纤维化过程的进展.
输尿管梗阻、miRNA、纤维化
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R73;R692;R285.5
国家自然科学基金;河南省人才培养联合基金
2014-06-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
290-295