TrkB-BDNF信号传导通路对神经母细胞瘤细胞耐药和转移的影响

摘要：

目的 TrKB-BDNF信号传导通路与神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞的化疗耐药和转移密切相关.本研究探讨阻断TrkB-BDNF信号传导通路的三条下游信号传导通路后,NB细胞SH-SY5Y对化疗药物顺铂的敏感性及分泌基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的影响.方法 常规培养SH-SY5Y NB细胞,用纳摩尔浓度全反式维甲酸(all-trans Retinoic Acid,ATRA)诱导酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor B,TrkB)高表达,加入脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF),从而激活TrkB-BDNF信号传导通路.用磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂LY294002、磷脂酶C(PLC)抑制剂U73122、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂U0126阻断该信号通路的相应下游信号传导通路后,加入化疗药顺铂(CDDP).四甲基偶氮蓝比色(MTT)实验方法检测应用三种抑制剂前后细胞的存活率的变化；流式细胞仪(FCM)检测应用三种抑制剂前后细胞凋亡率的变化.酶联免疫吸附测定(ELISA)技术检测SH-SY5Y细胞培养上清中MMP-9含量.结果 ATRA+ BDNF+ CDDP组NB细胞的存活率及凋亡率与对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).ATRA+ BDNF+LY294002+CDDP组细胞对顺铂的敏感性增加,细胞的存活率明显降低,凋亡率明显升高,与ATRA+ BDNF+ CDDP组相比,差异有统计学意义(P＜0.05)；而ATRA+ BDNF+ U73122+ CDDP组、ATRA+BDNF+ U0126+ CDDP组细胞对顺铂的敏感性降低,细胞的存活率明显升高,凋亡率明显降低,与ATRA+ BDNF+ CDDP组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).ELISA结果显示,ATRA+ BDNF组MMP-9含量明显高于对照组及ATRA组(P＜0.05)；ATRA+BDNF+ LY294002组MMP-9含量明显低于ATRA+ BDNF组(P＜0.05),与对照组及ATRA组比较差异无统计学意义(P＞0.05)；ATRA+ BDNF+ U73122组MMP-9含量明显高于对照组及ATRA组(P＜0.05),与ATRA+ BDNF组比较差异无统计学意义(P＞0.05).ATRA+ BDNF+ U0126组MMP-9含量明显高于对照组及ATRA组(P＜0.05),与ATRA+ BDNF组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 激活TrkB-BDNF信号传导通路可增强NB细胞耐药及促进其合成、分泌MMP9.TrkB-BDNF信号传导通路可能通过进一步激活其下游PI3K/Akt通路增强耐药及促进NB细胞合成、分泌MMP-9,用LY294002阻断PI3K/Akt通路后可逆转耐药及抑制NB细胞合成、分泌MMP-9,从而抑制NB的侵袭、转移.

关键词：神经母细胞瘤、信号传导、基质金属蛋白酶-9

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分类号：R730.264;R363.2;R285.5

资助基金：烟台市科学技术发展项目2008142-19

在线出版日期：2013-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：607-612