人羊水来源干细胞与生物可降解材料体内外复合培养构建组织工程膀胱平滑肌

摘要：

目的 探讨体外高效地诱导人羊水来源干细胞向平滑肌样细胞的分化,评估细胞与聚羟基乙酸(PGA)支架复合物的生物相容性,由此探讨该复合物用于组织工程膀胱平滑肌重建的可行性.方法 孕中期B超引导下穿刺抽取羊水,体外分离挑选原代人羊水来源的干细胞(hAFCESs),取第三代细胞用肌源性生长因子(PDGF-BB)和转化生长因子β1(TGF-β1)和左旋维生素C(L-AA)在体外分别诱导分化3周、4周和5周,然后光镜下观察诱导后细胞生长的形态变化,免疫荧光细胞染色和RT-PCR检测平滑肌细胞的标志物.取第四代人羊水来源干细胞种植到非编织PGA材料上,体外诱导培养4周后移植到裸鼠背部皮下,4周后取材进行体内外种植效果的评价.结果 hAVESCs体外增殖能力强,RT-PCR、免疫荧光细胞染色显示经诱导的hAFCSCs表达平滑肌细胞的标志物平滑肌肌动蛋白(α-SMA),肌钙蛋白(CALP),平滑肌22α(SM22α)和肌球蛋白重链(MHC).PGA支架上的hAFCSCs在种植4 h后开始正常贴附、生长和增殖,细胞形态良好.扫描电镜显示hAFCSCs紧密贴附到PGA支架材料上并分泌细胞外基质.冰冻切片免疫荧光染色显示组织块中表达平滑肌细胞的标志物.结论 hAFCSCs能在肌源性生长因子(PDGF-BB和TGF-β1)和左旋维生素C(LAA)的诱导作用下高效地分化为平滑肌样细胞.复合hAFCSCs的PGA支架体外具有良好的生物相容性及体内较好的组织相容性,表明以hAFCSCs为种子细胞、PGA为支架构建组织工程膀胱平滑肌具有可行性.

关键词：羊水、干细胞、组织工程

所属期刊栏目：32

分类号：R318.08(医用一般科学)

资助基金：上海市科学技术委员会基金07XD14024;08jc1416000;上海市教育委员会科研创新项目09YZ90

在线出版日期：2011-09-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：543-549