神经管缺陷胎儿和神经管缺陷胎鼠羊水蛋白质标记物的比较研究

摘要：

目的 利用表面增强激光解析/离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术研究神经管缺陷胎儿羊水和神经管缺陷胎鼠羊水的蛋白质谱变化规律.方法 根据实验对象不同分为①经超声确诊为胎儿神经管缺陷的孕妇11例为畸形组.包括脊柱裂5例,无脑儿5例.脑积水1例,病例组孕母均于引产前经腹抽取羊水5 ml,另选产前行羊膜腔穿刺取羊水做染色体核型检测,结果正常且孕周数相匹配的正常孕妇9例为对照组;②45只雌性Wistar大鼠(体重220～260 g),随机分为畸形组(n=30)和对照组(n=15).在标准条件下饲养,午夜雌:雄=4:16笼.次日清晨8时阴道涂片,镜检精子,确定其妊娠日期,有精子者计为孕0日(E_0).在孕10日(E_10)晨8时,畸形组雌鼠称体重.按120mg/kg称取维甲酸与矿物油混合均匀(维甲酸浓度为40mg/ml),经胃管一次注入孕鼠胃内.对照组仅将与畸形组同量且不含维甲酸的矿物油经胃管一次注入.在孕17 d剖腹,每只胎鼠抽取羊水约0.1～0.3 ml,选取11只脊柱裂畸形胎鼠的羊水,15只正常对照胎鼠的羊水.选用CM10蛋白质芯片,在PBSⅡ C型蛋白质芯片阅读机读取数据.采用Ciphergen protein chip 3.1.1软件对数据进行统计分析.结果在设定的优化相对分子量1～30 × 10~3范围内,神经管缺陷胎儿的孕母羊水中共检测到35个差异蛋白峰,其中7个有统计学意义,有6种蛋白质/多肽高表达,相对分子质量分别为14 700,7 995,15 891,16 027,13 776,11 040;1种蛋白质/多肽低表达,相对分子质量为23 417.神经管缺陷胎鼠羊水中共检测到55个羊水差异蛋白峰,有统计学意义的差异蛋白峰有9个.脊柱裂畸形组有5种蛋白质/多肽高表达,相对分子质量分别为11 658,27 387,7 898,11 603,13 829;4种蛋白质/多肽低表达,相对分子质量分别为5 124,14 702,5 403,13 626.将神经管缺陷胎鼠和神经管缺陷胎儿羊水蛋白质谱进行比较分析,发现二者羊水中共同蛋白质/多肽:4 138(4 145),7947(7941),8 588(8 588),9 385(9 390),14 702(14 700).其中14 700(P=0.006)差异具有统计学意义,很可能是神经管缺陷胎儿和神经管缺陷胎鼠羊水共同蛋白质/多肽标志物.结论 神经管缺陷胎儿和胎鼠羊水中可能存在相同的特异性蛋白质/多肽标志物,相对分子质量14 700的蛋白质/多肽对神经管缺陷诊断具有更重要的意义.

关键词：神经管缺陷、表面增强激光解析/离子化飞行时间质谱、羊水、蛋白质标志物

所属期刊栏目：30

分类号：R71(妇产科学)

资助基金：国家自然科学基金30571934

在线出版日期：2010-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：777-781