10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2000.04.017
MDR1基因转染K562细胞株及人骨髓干祖细胞的研究
目的研究应用基因工程技术将外源性MDR1基因转染K562及人骨髓干祖细胞,使其获得多药耐药表型,抵抗化疗中出现的骨髓抑制的可行性.方法采用磷酸钙沉淀法建立产病毒包装细胞;上清液法分别感染K562细胞和人骨髓干祖细胞;集落筛选法、流式细胞仪、SP免疫组化法检测基因转染率;MTT法、柔红霉素泵出实验检测Pgp的功能;流式细胞仪分析细胞周期及SP法检测bcl-2、c-myc基因表达,了解转染行为对靶细胞增殖、凋亡的影响.数据分析用配对t检验.结果①被转染的K562细胞人骨髓干祖细胞最高转染率分别为34%、35%.②被转染细胞具有外源性多药耐药功能.③转染未引起异常凋亡及增殖发生.结论用MDR1基因转染K562、骨髓干祖细胞是一种稳定、有效、安全的生物治疗方法,这项研究为临床应用MDR1基因转染骨髓干祖细胞,回输患者体内,保护骨髓免遭化疗损害,从而为实施大剂量、冲击式化疗, 提高治愈率奠定基础,对最终临床实施MDR1基因治疗辅助化疗有重要意义.
多药耐药基因、转染、K562细胞株、造血干细胞、细胞凋亡
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R72(儿科学)
2004-04-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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