10.3969/j.issn.1008-0414.2001.04.005
基因免疫的研究现状
@@1 基因免疫的DNA载体
应用外源基因免疫试验动物,首先要制备大量的外源基因,其次是外源基因导入动物细胞内不被降解,三是外源基因在动物细胞内能够高效表达。要满足以上要求,必须采用适宜的DNA作为基因的载体即质粒DNA。用于基因免疫的载体应具有以下特点,①具有高拷贝数的复制原点:Ecol I质粒的复制原点是高产质粒复制原点,经振荡培养后,质粒产量可达15~30mg/L,是理想的复制原点,构建载体时,最好携带这种原点。②抗性基因:作为基因载体应具有选择标记,同时保证唯有携带质粒的菌体才能在培养基上生长。③表达调节元件:强启动子和mRNA转录终止序列,确保外源基因的高水平表达。常用的表达调节元件有人巨细胞病毒早期启动子(PCM-VIE)、劳斯肉瘤病毒长末端重复序列(RSV-LTR)、SV40早期启动子及牛生长激素3’端非翻译区(BGH3’-UTR)或SV40转录终止序列。哺乳动物的基因表达常因内含子的存在而增强,故此,很多基因载体中也含有内含子,实验结果表明,携带M-VIE启动子,内含A,BGH3’-UTR的载体诱导免疫应答的效果较佳。
外源基因导入、复制原点、基因载体、强启动子、基因免疫、质粒、试验动物、调节元件、长末端重复序列、细胞内、人巨细胞病毒、内含子、牛生长激素、高水平表达、转录、选择标记、免疫应答、抗性基因、基因表达、高效表达
S813.3(普通畜牧学)
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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