红千层ISSR反应体系的优化

摘要：

以红千层(Callistemon rigidus R.Br.)的幼叶为材料,利用正交试验设计,对ISSR反应体系中的主要影响因子进行优化筛选,研究了Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTPs、引物、模板DNA浓度5种因素对扩增结果的影响,同时研究了退火温度和循环次数对PCR扩增结果的影响.实验结果表明,在25μL ISSR反应体系中各组分的最适浓度分别为:1×PCR buffer,2.5 mmol/L Mg2+,0.2 mmol/L dNTPs,0.4μmol/L引物,1.2 ng/μL模板DNA,0.5 U TaqDNA聚合酶.通过梯度PCR测验,适宜的退火温度为50℃,循环次数45次.并且在红千层ISSR分析中,带纹清晰,稳定性好.

关键词：红千层、ISSR、正交设计、梯度PCR

所属期刊栏目：34

分类号：S685(观赏园艺（花卉和观赏树木）)

在线出版日期：2006-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1-4