重组人生长激素受体胞外段及其突变体S201C

摘要：

目的 研究重组人生长激素受体胞外段(rhGHRECD)与人生长激素(hGH)结合动力学.方法 用定点诱变PCR法获得rhGHRECD突变体S201C碱基序列.将测序正确的质粒pET20b(+)-hGHRECD、rhGHRECD(S201C)转入BL21(DE3)表达,纯化得到蛋白.采用放免分析法测定rhGHRECD、rhGHRECD(S201C)蛋白与hGH的结合解离常数(Kd);采用BIAcore检测rhGHRECD(S201C)与hGH的结合动力学.结果 放免测得KdWT=1.879×10-10 M、KdS201C=1.937×10-10 M;BIAcore 测得结合速度(Kon)= 3.2 ×105 (M-1·s-1), 解离速度(Koff)= 3.9 ×10-5 (s-1),Kd=1.220 ×10-10M.结论 rhGHRECD、rhGHRECD(S201C)与商品化的hGH具有极高的结合能力;rhGHRECD、rhGHRECD(S201C)与hGH结合,具有同样高的亲和力;rhGHRECD(S201C)可锚定于BIAcore芯片上,实时检测重组的hGH Site1与受体结合的动力学变化.

关键词：人生长激素受体细胞外段、人生长激素、突变体、表达、纯化

所属期刊栏目：22

分类号：R335(人体生理学)

在线出版日期：2008-06-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：16-19