割手密抗旱相关基因SsREMO-1a的表达与功能分析

摘要：

[目的]获得割手密SsREMO-1a基因全序列,开展组织特异表达、qPCR分析、亚细胞定位研究,研究转SsREMO-1a基因拟南芥的表型变化以及CAT基因的表达模式.[方法]以海南甘蔗野生种(割手密Sp-24)为材料,通过PCR、纯化、克隆和测序验证后获得完整的割手密SsREMO-1a基因序列.对苗期正常生长的割手密进行干旱胁迫处理,于胁迫处理后0、1、2、3、4和5 d收集幼嫩叶片、根和茎等组织进行组织特异表达分析和qPCR分析.采用烟草亚细胞定位技术、基因遗传转化技术等对SsREMO-1a的表达情况进行组织定位和功能分析.构建pBI221-SsREMO-1a-GFP融合表达载体,通过农杆菌转化烟草进行细胞定位分析.构建过量表达载体pCAMBIA 1304-SsREMO-1a,利用农杆菌转化法将SsREMO-1a导入拟南芥,观测干旱胁迫后0、1、2、3、4和5 d植株表型以及CAT-1基因表达量.[结果]SsREMO-1a基因全长均为738 bp,开放读码框(ORF)564 bp,编码187个氨基酸;组织特异性表达表明,SsREMO-1a在根、茎、叶中均有表达;qPCR分析结果表明,该基因受干旱胁迫的诱导并呈显著上调表达;亚细胞定位结果表明,SsREMO-1a蛋白定位于细胞膜上;共获得11个转基因拟南芥株系,抗旱性鉴定表明转基因植株能够提高植株的抗旱能力;转基因植株CAT-1基因表达量显著升高.[结论]SsREMO-1a能够提高植株的抗旱能力,对CAT-1基因具有一定的调控作用.

关键词：割手密、REMO基因、干旱胁迫、定量表达、功能分析

所属期刊栏目：37

分类号：S566.1(经济作物)

资助基金：嘉兴职业技术学院三创项目;国家重点研发计划;嘉兴职业技术学院校级科研项目;中国职业技术教育学会科研课题

在线出版日期：2024-08-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1196-1202