玉米ZmSTP1和ZmAAP2基因启动子区域结合蛋白的检测

摘要：

[目的]植物特异性转录因子NLPs(NIN-like proteins)是硝酸盐响应顺式元件(NRE)的结合蛋白,在硝酸盐调控的下游基因表达中起转录激活作用.玉米转运蛋白ZmSTP1和ZmAAP2在植物碳氮产物的运输和卸载过程中发挥作用,且基因启动子区域均含有一个硝酸盐响应顺式元件.本研究旨在证实玉米ZmNLPs家族成员ZmNLP3、ZmNLP4是否为ZmSTP1和ZmAAP2基因启动子中NRE的结合蛋白.[方法]以玉米B73为试验材料,首次利用酵母单杂交技术检测ZmNLP3、ZmNLP4转录因子分别与Zm-STP1和ZmAAP2基因启动子区域的相互作用.[结果]在线预测网站Plantcare对ZmSTP1和ZmAAP2基因转录起始位点上游2000 bp序列分析表明,位于2个基因转录起始点上游-577～-589 bp和-909～-921 bp区域均包含一个序列长12 bp的NRE元件,结构分别为5'-ATTTAATACTCA-3'和 5'-ATATATAAGTCA-3';诱饵菌株AbAr基因表达检测显示,能抑制诱饵菌株Y1H(pAbAi-ZmnSTP1)和 Y1H(pAbAi-ZmAAP2)本底表达的最低 AbA 浓度均为 200 ng/mL;将 pGADT7-ZmNLP3/4 分别转化 Y1H(pAbAi-ZmSTP1)和Y1H(pAbAi-ZmAAP2)菌株后,在对照培养基(SD/-Leu)和含AbA浓度为200 ng/mL的筛选培养基中Y1H[(pAbAi-ZmSTP1)/(pGADT7-ZmNLP3)]、Y1H[(pAbAi-ZmSTP1)/(pGADT7-ZmNLP4)]、Y1H[(pAbAi-ZmAAP2)/(pGADT7-ZmNLP3)]、Y1H[(pAbAi-ZmAAP2)/(pGADT7-ZmNLP4)]菌株均能正常生长.[结论]玉米转录因子ZmNLP3、ZmNLP4均能与ZmSTP1和ZmnAAP2基因启动子区域相互作用,是靶基因ZmSTP1和ZmnAAP2启动子区域NRE的结合蛋白.本研究为深入了解ZmNLPs家族成员参与的硝酸盐信号响应提供理论基础,也为玉米增产和氮素增效提供分子标记和理论依据.

关键词：玉米、酵母单杂交、转运蛋白、ZmNLPs

所属期刊栏目：36

分类号：S513(禾谷类作物)

资助基金：国家自然科学基金;云南省地方本科高校基础研究联合专项面上项目;云南省大学生创新创业训练计划项目

在线出版日期：2023-07-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：897-903