10.16213/j.cnki.scjas.2022.6.029
兔BMP4基因对毛囊发育相关基因表达的影响
[目的]为了研究骨形态发生蛋白4(BMP4)对兔毛囊发育相关基因的影响.[方法]利用显微切割和二步酶消化相结合的方法分离了兔毛乳头细胞,并通过免疫荧光染色检测毛乳头细胞的特异性标记物α-SMA和VIM的表达情况.构建pcDNA3.1-BMP4过表达载体,转染至毛乳头细胞中,利用荧光定量PCR技术分析BMP4基因对毛囊发育相关基因(ID1、ID2、SAMD7、FGF1、TGF-β)mRNA表达的影响,通过CCK-8细胞增殖实验验证BMP4基因对兔毛乳头细胞生长的作用.[结果]免疫荧光结果显示,分离培养的细胞为毛囊真皮源性的毛乳头细胞.进一步成功克隆了家兔BMP4基因,发现其CDS序列全长为1230 bp,编码409个氨基酸,预测为亲水性外分泌蛋白,含有1个信号肽序列,无跨膜结构域.荧光定量PCR结果显示,过表达BMP4能显著升高ID1、ID2、SAMD7的mRNA表达水平(P<0.01),但显著抑制FGF1的mRNA表达水平(P<0.05).通过CCK-8细胞增殖实验发现,过表达BMP4基因极显著抑制毛乳头细胞增殖(P<0.01).[结论]BMP4基因可能通过影响毛乳头细胞中毛囊发育相关基因的表达,抑制毛乳头细胞增殖,参与家兔毛囊发育过程.
兔、骨形态发生蛋白4、毛囊发育、毛乳头细胞、基因表达
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S829.9(家畜)
现代农业产业技术体系;国家自然科学基金
2022-08-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
1448-1454