香蕉磷脂酶D的纯化与生化特性分析

摘要：

[目的]分离纯化香蕉磷脂酶D(PLD)并分析其生化特性,为深入研究香蕉PLD打下基础.[方法]采用硫酸铵沉淀结合柱层析法对香蕉PLD粗酶液进行纯化,考察反应体系中香蕉PLD蛋白含量、Ca2浓度、pH和反应时间对PLD活性的影响,明确PLD的生化特性.[结果]80％硫酸铵沉淀结合DEAE-sepharose CL-6B阴离子交换柱、Hitrap SP HP阳离子交换柱和Sephadex G-200凝胶层析柱,可将香蕉PLD粗酶液纯化58.74倍,达到电泳纯,香蕉PLD的相对分子量约为43 kD;香蕉PLD活性最佳测定条件为:PLD蛋白含量30.00 μg、Ca2+浓度1.20 mmol/L、反应15.00 min、pH 6.5,确定香蕉PLD具有较强亲和力和较高催化活性.[结论]硫酸铵沉淀结合柱层析分离技术适用于香蕉PLD纯化,在PLD蛋白含量30.00 μg、Ca2+浓度1.20 mmol/L、反应15.00 min及pH 6.5条件下,香蕉PLD活性最高.

关键词：香蕉;磷脂酶D;分离纯化;生化特性

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分类号：S668.1(果树园艺)

资助基金：广西自然科学基金项目;国家现代农业产业技术体系建设专项;广西"八桂学者"工程专项;广西科技重大专项;广西科技基地和人才专项;广西农业科学院基本科研业务费项目

在线出版日期：2021-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1413-1418