3种兜兰属植物叶片总RNA提取方法的研究

摘要：

[目的]旨在获得兜兰属植物叶片总RNA的高质量提取方法,为后续相关分子生物学研究开展提供一定参考.[方法]以紫纹兜兰、长瓣兜兰和杏黄兜兰3种兜兰属植物叶片为试材,通过1.0％琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计法对4种不同提取方法获得的总RNA进行质量检测,筛选最适方法,并通过RT-PCR进一步验证.[结果]使用商品化RNA试剂盒法提取的兜兰属植物叶片总RNA纯度好,但完整性一般;改良CTAB法提取的兜兰属植物叶片总RNA纯度和完整性虽较好,但提取效率不高;改良Trizol法(Ⅰ)提取的兜兰属植物叶片总RNA虽完整性好,但纯度差,存在多糖、蛋白质等杂质污染;改良Trizol法(Ⅱ)获得的兜兰属植物叶片总RNA纯度和完整性均最好;以改良Trizol法(Ⅱ)获得的总RNA为模板,应用RT-PCR能成功克隆获得3种兜兰属植物rbcL基因252 bp的目的序列.[结论]综合比较以上4种方法,试验改良的Trizol法(Ⅱ)是适合紫纹兜兰、长瓣兜兰和杏黄兜兰3种兜兰属植物高质量总RNA提取的有效方法.

关键词：兜兰属植物、RNA提取、改良Trizol法、改良CTAB法

所属期刊栏目：34

分类号：S682(观赏园艺（花卉和观赏树木）)

资助基金：国家自然科学基金;国家重点实验室开放基金

在线出版日期：2021-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：827-833