低温胁迫下香梨优斑螟内参筛选及HSP70、HSP90基因表达分析

摘要：

[目的]为筛选出香梨优斑螟(Euzopherapyriella)在低温胁迫下合适的内参基因,并明确低温胁迫对热激蛋白基因表达的影响.[方法]从梨园采集香梨优斑螟5龄幼虫,于4 ℃处理0、0.25、1、3、8、12、18、24 h,以实时荧光定量技术测定内参基因及热激蛋白基因的表达丰度,利用△Ct法、GeNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder软件综合评价5个内参基因的稳定性,进一步分析低温处理后热激蛋白(HSP70和HSP90)基因表达规律.[结果]△Ct和Normfinder方法的内参基因稳定性为UBQ > GAPDH >Actin > 18s > TUB,BestKeeper方法中18s和UBQ基因表现最为稳定,GeNorm认为Actin和GAPDH稳定性好,其次是UBQ,RefFinder综合评价稳定性UBQ最高,其次为G4PDH,而稳定性最差的是TUB.以UBQ为内参基因,发现热激蛋白家族中HSP70和HSP90基因相对表达量都是在1h处理时达到峰值、然后下降,在18 h后有小幅度上升,维持在较高的水平,总体上表达呈现显著的先上升后下降的趋势.[结论]香梨优斑螟在温度胁迫中UBQ和GAPDH基因较为稳定.HsP70和HSP90基因对低温胁迫响应曲线相似,24 h内基因表达显著高于对照,这可能有助于提升幼虫对低温的耐受力.

关键词：香梨优斑螟、低温胁迫、内参基因、热激蛋白、基因表达

所属期刊栏目：33

分类号：S436.619(病虫害及其防治)

资助基金：国家自然科学基金31560512,31760516

在线出版日期：2021-01-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2503-2508