枯草杆菌芽孢皮层裂解酶CwlJ的重组表达及分离纯化

摘要：

[目的]皮层裂解酶是芽孢所特有的专一水解皮层肽聚糖的酶,肽聚糖的水解是造成芽孢死亡的重要原因,分离提取芽孢皮层裂解酶CwlJ为推动CwlJ水解肽聚糖进而杀灭芽孢并应用于食品杀菌提供了原材料.[方法]本文将获得的皮层裂解酶CwlJ基因导入质粒pCZN 1,成功构建了基因工程菌.运用IPTG诱导重组菌表达目的蛋白CwlJ,SDS-PAGE和Western-Blot检验重组皮层裂解酶的表达情况,并用亲和层析法纯化重组蛋白CwlJ.[结果]0.5 mM的IPTG能实现CwlJ基因的大量表达,纯化后的重组皮层裂解酶CwlJ分子量为17.9 KD,最适温度为40℃、最适pH为5,比酶活力146.67 U/mg.[结论]相比从天然芽孢中提取出来的皮层裂解酶,重组皮层裂解酶CwlJ的活性提高了2倍,保证了皮层裂解酶CwlJ进一步水解肽聚糖实验的进行.

关键词：芽孢、皮层裂解酶CwlJ、重组表达、分离纯化

所属期刊栏目：32

分类号：TS2(食品工业)

资助基金：国家自然科学基金项目31760474;国家自然科学基金项目31460410

在线出版日期：2020-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2564-2570