2A肽介导的割手密ScNAC1、ScDREB融合基因表达载体构建

摘要：

[目的]本研究旨在构建适合甘蔗遗传转化的双基因表达载体,用于提高甘蔗栽培品种的抗旱能力,并探讨基因表达规律及互作效应.[方法]本研究以前期课题组在割手密中克隆到的具有抗旱功能ScNAC1和ScDREB为目的基因,以对单子叶植物高效、专一的Ubiquitin为启动子,以适于单子叶植物遗传转化的表达载体pCAMBIA1300-nu为基础载体,利用改造后的FMDV2A多肽进行连接,采用重叠延伸PCR(简称SOE PCR)将ScNAC1和ScDREB基因相融合,利用同源重组的方法连接表达载体.[结果]经PCR验证获得约2000 bp的目的条带,利用BamH Ⅰ与Sac Ⅰ双酶切,切出了载体的1条大片段和连接目的基因的3条小片段,测序结果验证扩增产物的正确性,融合基因在扩增过程中无突变发生.[结论]本研究成功构建了符合需要的融合基因表达载体,为后期甘蔗的遗传转化研究奠定了基础.

关键词：ScNAC1、ScDREB、融合基因、2A肽、pCAMBIA1300nu

所属期刊栏目：32

分类号：S566(经济作物)

资助基金：国家自然科学基金31560417;国家重点研发计划项目2018YFD1000503;云南省现代农业甘蔗产业技术体系建设专项2009-2019

在线出版日期：2019-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1492-1497