A型流感病毒H7N9株PB1和PB2基因的克隆和真核表达

摘要：

[目的]本试验旨在构建A型H7N9流感病毒RNA聚合酶类蛋白PB1和PB2真核表达载体,并在293T细胞中表达其编码的蛋白.[方法]首先提取苏州分离株A型H7N9流感病毒的总RNA,通过RT-PCR技术获得了A型H7N9流感病毒PB1和PB2的全长基因,然后将其克隆至真核表达载体pRK中构建pRK-Flag-PB1/PB2真核重组表达载体,经酶切及测序鉴定正确后将质粒转染到293T细胞中,通过Western blot鉴定PB1/PB2蛋白的表达.[结果]成功克隆了PB1和PB2全长基因,构建了A型H7N9流感病毒PB1和PB2蛋白真核表达载体pRK-Flag-PB1/PB2,并在293T细胞中转染表达,Western blot确定了PB1/PB2蛋白的成功表达.[结论]该表达载体的成功构建及在293T细胞中成功表达PB1和PB2蛋白,为后期开展流感病毒蛋白功能及与真核细胞中的蛋白相互作用的研究奠定了基础.

关键词：A型流感病毒、PB1基因、PB2基因、克隆、真核表达

所属期刊栏目：32

分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：西北民族大学研究生科研实践创新项目Yxm2018136;Zbtb1基因调控小鼠造血干细胞向淋巴细胞分化的机制研究17JRSRA277;PLZF基因影响先天样T淋巴细胞胸腺滞留的功能和机制研究31700763;Zbtb1基因在T细胞发育过程中调控IL-7Rα表达的功能和机制研究81760287

在线出版日期：2019-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1448-1451