非洲猪瘟病毒P30-54融合蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及反应原性研究

摘要：

[目的]非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种严重危害猪养殖业的急性烈性传染病.[方法]为了制备特异性强、敏感性高的ASFV血清学诊断用抗原,本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达了ASFV P30-54融合蛋白基因.将P30-54融合蛋白基因克隆入杆状病毒转座载体质粒pFastBac1中,构建重组质粒pFastBac-P30-54;将重组质粒转化DH10 Bac感受态细菌进行重组,经抗性与蓝白斑筛选得到杆状病毒重组质粒Bacmid-P30-54;将reBacmid-P30-54转染sf9细胞,获得重组杆状病毒reAcMNPV-P30-54.将获得的reAcMNPV-P30-54接种sf9细胞,待细胞出现CPE时收集细胞,用间接免疫荧光试验(IFA)和SDS-PAGE进行分析重组蛋白的表达情况;通过Western blot检测重组蛋白的反应原性.[结果]在重组杆状病毒中成功表达P30-54蛋白,该重组蛋白可与ASFV多克隆抗体发生免疫学反应.[结论]证实该重组蛋白具有良好的反应原性.

关键词：非洲猪瘟病毒、P30-54融合蛋白、杆状病毒表达系统、反应原性

所属期刊栏目：32

分类号：S858.28(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划项目子课题2017YFD0502300;兵团中青年科技创新领军人才计划2016BC001

在线出版日期：2019-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：684-688