10.16213/j.cnki.scjas.2018.9.031
一株白牦牛源牛病毒性腹泻病毒EO基因的原核表达与序列分析
[目的]本研究旨在对来源于白牦牛的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)GSTZ株的E0基因进行分析,并利用E0基因对GSTZ进行基因分型.[方法]通过提取牛病毒性腹泻病毒(BVDV)RNA,使用RT-PCR技术扩增BVDV E0基因,将其插入到pET-28a中,构建pET-28a-E0原核表达载体,转化BL21(DE3)感受态细胞,筛选阳性克隆,鉴定及测序.IPTG诱导后使用BVDV阳性血清作一抗,经western blot鉴定.根据E0基因的序列进行同源性分析以及构建E0基因系统发育进化树.利用DNAstar预测E0蛋白的抗原表位.[结果]本研究表达的E0蛋白大小与预期结果相符且该蛋白具有良好的抗原性.通过对E0基因序列的同源性分析以及构建E0基因系统发育进化树,说明牛病毒性腹泻病毒GSTZ株基因型可能属于牛病毒性腹泻病毒-1a亚型,也可能是其他基因亚型发生较大突变产生变异.通过预测E0蛋白B细胞的抗原表位主要位于:7-12、22-26、6263、94-97、101-105、115-119、127-128、138-140、185-187、215-219位氨基酸残基;T细胞潜在优势抗原区域主要位于:10-14、1931、3643、52-58、77-86、96-98、137-140、148-150、167-191、209-211位氨基酸残基.[结论]E0蛋白具有良好的抗原性,通过对抗原表位预测以及对GSTZ进行基因分型,为后续基因工程疫苗和BVDV检测试剂盒的开发提供了理论依据.
牛病毒性腹泻病毒、E0基因、原核表达、序列分析、抗原表位
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S852.653(动物医学（兽医学）)
动物医学生物工程创新团队发展计划IRT_17R88;科技部援助项目资助KY201501005;甘肃省科技计划资助1504WKCA094;研究生科研创新项目Yxm2018138
2018-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
1961-1968
