麻花艽β-amyrin合成酶基因GsAS2的载体构建及遗传转化

摘要：

[目的]本文拟进行麻花艽β-amyrin合成酶基因GsAS2的载体构建及遗传转化.[方法]首先利用gateway方法进行GsAS2的RNAi载体(pK7GWIWG-GsAS2)和过表达载体(pK7WG2D-GsAS2)的构建,并利用基因枪转化麻花艽胚性愈伤组织,经卡那霉素(Kan)筛选后,进一步用35S启动子引物进行抗性植株总DNA的PCR检测.[结果]获得GsAS2的RNAi阳性植株5株,过表达植株8株,转化频率分别为2.94％和4.00％.对转基因植株进行GsAS2的半定量RT-PCR分析和齐墩果酸的HPLC测定表明:GsAS2的表达在RNAi系中受到较大抑制,其齐墩果酸含量均低于对照(为对照的48.5％～80.7％),而在过表达系中GsAS2则超量表达,且齐墩果酸含量均高于对照(为对照的1.67～2.46倍).[结论]说明GsAS2的表达与下游产物齐墩果酸的含量关系密切.

关键词：麻花艽、β-amyrin合成酶基因、载体构建、遗传转化

所属期刊栏目：30

分类号：Q81(生物工程学(生物技术))

资助基金：莱芜职业技术学院博士科研启动基金2015bsky01

在线出版日期：2018-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2444-2448