10.16213/j.cnki.scjas.2017.7.018
桑粉虱种特异性引物筛选
[目的]桑粉虱Pealius mori(Takahashi)与其他种类粉虱形态相似,识别困难.设计、筛选桑粉虱种特异性引物,为桑粉虱检测和鉴定提供理论依据.[方法]DNAMAN软件比较与桑粉虱同源性较高的国内外具有代表性的7种粉虱线粒体COⅠ基因序列,应用Primer 5.0软件设计5对桑粉虱COⅠ基因特异性引物.将各对引物与不同种类粉虱成虫基因组DNA模板进行PCR扩增,检测目的条带,筛选桑粉虱种的特异性引物.以桑粉虱的卵和幼虫基因组DNA为模板,验证所筛选出的桑粉虱种特异性引物的灵敏性.[结果]2对桑粉虱种特异性引物sfs1-1/sfs1-2、sfs5-1/sfs5-2对桑粉虱单头成虫基因组DNA的PCR扩增产物分别为450、300 bp,而对烟粉虱B型、温室白粉虱无扩增效果.2对引物对桑粉虱DNA模板浓度最低检测值分别为0.15 pg/μ l、0.15 ng/μl.引物sfs1-1/sfs1-2灵敏性较引物sfs5-1/sfs5-2高1000倍.2对引物对桑粉虱成虫、幼虫及卵粒的线粒体CO Ⅰ基因皆具较好扩增能力.[结论]引物sfs1-1/sfs1-2、sfs5-1/sfs5具桑粉虱种的特异性,引物sfs1-1/sfs1-2为桑粉虱检测、鉴定的首选引物.
桑粉虱、线粒体COⅠ基因、种特异性引物、筛选
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S888.739;S435.79(蚕桑)
云南省现代农业蚕桑产业技术体系项目2013KJTX006;现代农业产业技术体系建设专项项目CARS-22-SYZ27
2017-09-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1570-1575