适用于双向电泳的芒果叶片蛋白提取方法的建立

摘要：

为建立一套适用于鉴别“四季芒”成花蛋白表达差异的双向电泳方法,摸索出合适的芒果叶片蛋白提取方案.以“四季芒”芒果叶片为材料,采用T℃A-丙酮法、酚抽提乙酸铵沉淀法、改良酚抽提乙酸铵沉淀法等3种芒果叶片蛋白提取方法,进行SDS-PAGE和双向电泳,比较这些方法的提取效果.结果表明,改良酚抽提乙酸铵沉淀法比一般酚抽提法获得更高质量的蛋白.对沉淀产物洗涤和干燥步骤的优化能有效提高TCA-丙酮法蛋白提取质量.提取液pH能明显影响改良酚抽提乙酸铵沉淀法所提蛋白的得率、2-DE凝胶蛋白点数量和分布.pH 8.5提取液所提蛋白获得最多的2-DE蛋白点,但在小分子区域蛋白分辨率比pH9.0提取液所提蛋白低.TCA-丙酮法所提蛋白在大分子区域2-DE蛋白点分辨率不如改良酚抽提乙酸铵沉淀法,但小分子和高等电点区蛋白点分辨率却明显好于后者.实验表明改良酚抽提乙酸铵沉淀法和ICA-丙酮法有很强的互补性,可以在双向电泳体系中组成双提取法提高蛋白分辨率.

关键词：芒果、蛋白提取、双向电泳、蛋白质组

所属期刊栏目：28

分类号：S667.7(果树园艺)

资助基金：广西自然科学基金项目2012GXNSFBA053046;广西农科院基本科研专项桂农科2012YZ17,桂农科2013YF01;国家现代农业产业技术体系广西杧果创新团队桂南综合试验站桂农发[2011]33号

在线出版日期：2016-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2696-2700