向日葵黑茎病双重PCR检测实用化研究

摘要：

本研究采用从新疆田间分离经ITS序列扩增、测序鉴定了的黑茎病菌株BXC1为供试菌,对其双重PCR分子检测、灵敏度试验以及模拟带菌组织的分子检测,再将此菌株采用不同接种方式人工接种2种向日葵品种幼苗,待其出现典型症状时,对其进行双重PCR实际检测.结果表明,无论是黑茎病菌基因组DNA、还是其与向日葵基因组的混合DNA都能扩增出真菌的邢区特异带(580bp)和黑茎病菌Aain基因的特异带(255bp),且混合DNA还能扩增出向日葵的册特异带(约740bp),说明向日葵黑茎病菌的此种双重PCR分子检测方法具有很好的特异性;梯级稀释真菌DNA或向日葵基因组DNA或其混合DNA模板的双重PCR检测表明,在20μl PCR反应体系中,黑茎病菌DNA的检测灵敏度均为0.05nV/#;接种了BXC1的向日葵,其带菌组织DNA均能检测出向日葵与罴茎病的ITS序列以及黑茎病Actin基因特异条带.这些结果表明,此向日葵黑茎病菌的双重PCR检测体系特异、可靠、便捷,可对带菌向日葵组织进行直接快速分子检测.

关键词：向日葵黑茎病、BXC1菌株、双重PCR检测、灵敏度试验、带菌组织检测

所属期刊栏目：28

分类号：S435.655(病虫害及其防治)

资助基金：科技部"十二五"科技支撑项目2012BAK11B02;中华人民共和国质检总局项目2012IK286、2013IK290

在线出版日期：2015-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2103-2106