细胞色素P4503A46基因的异源表达及药物代谢活性分析

摘要：

为了克隆巴马小型猪细胞色素P4503A46基因,建立P4503A46稳定表达肝癌细胞株(HepG2-P4503A46),并探究其药物代谢活性,通过RT-PCR从肝组织中钓取基因P4503 A46,将基因与真核表达载体pcDNA3.1连接并转染HepG2细胞,经G418筛选10代,获得稳定表达重组细胞株HepG2-P4503A46,以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)探针药物,将探针药物与重组细胞在优化的细胞浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育,通过高效液相色谱仪检测其药物代谢(抑制)动力学参数,并将对照组进行比较分析.结果表明,本研究成功从人Bama小型猪肝组织克隆了P4503A46基因,并通过G418筛选,成功建立了细胞稳定表达株,其硝苯地平代谢活性显著高于阴性对照组(P＜0.01);因此,成功克隆、并建立了小型猪P4503A46的稳定表达细胞株(HepG2-P4503 A46),该细胞株具有显著的硝苯地平代谢活性.

关键词：基因、克隆、重组细胞株、细胞色素P4503A46、代谢活性

所属期刊栏目：28

分类号：R349(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家“十五”科技攻关计划重点项目资助课题2004BA717B23

在线出版日期：2015-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：381-385