甜菜树ISSR-PCR反应体系的建立与优化

摘要：

采用正交和单因素试验设计方法,对影响甜菜树ISSR-PCR反应体系的dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物、模板DNA及退火温度5个因素进行优化试验,建立了稳定的、可重复的甜菜树ISSR-PCR扩增反应体系.在20μl的反应体系中,dNTPs浓度为0.4mmol/L,TaqDNA聚合酶用量为1.0U,引物浓度为0.2 μmol/L,模板DNA浓度为45ng.扩增程序:94℃预变性5min;94℃变性1 min,52℃退火1 min,72℃延伸2min,40个循环,最后72℃延伸8 min.这一优化体系的建立为深入展开甜菜树种质资源的遗传多样性研究奠定基础.

关键词：甜菜树、ISSR-PCR、正交设计、单因素试验、优化

所属期刊栏目：27

分类号：Q949(植物学)

资助基金：云南大学生命科学学院科学研究与人才培养开放基金2012S202

在线出版日期：2015-03-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2574-2579