版纳微型猪近交系TNF-α基因克隆、序列分析及分子系统进化研究

摘要：

分别提取版纳微型猪近交系18种组织的RNA,反转录为cDNA,利用RT-PCR方法扩增肿瘤坏死因子(TNF-α)基因编码区全长序列,将纯化的片段与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌DH 5α,筛选阳性克隆并测定其序列,利用生物信息学方法分析其序列特征,并与其他15个物种构建系统进化树.同时采用半定量RT-PCR方法分析TNF-α基因在版纳微型猪近交系18种组织中的表达情况.结果显示,版纳微型猪近交系TNF-α基因编码区全长699 bp(GenBank登录号:JF831365),编码232个氨基酸.氨基酸序列同源性分析表明,与猫等12个物种具有80％以上的相似性,分子系统进化表明与牛、山羊、绵羊及海豚的关系较近.多组织半定量RT-PCR研究表明,TNF-α mRNA在版纳微型猪近交系的多个组织中均有表达,其中在中脑、卵巢、脾、肺、神经及胃中表达量较高.

关键词：版纳微型猪近交系、TNF-α基因、序列分析、系统进化、组织表达

所属期刊栏目：25

分类号：S828(家畜)

资助基金：云南省教育厅科学研究基金项目2010Y219,2011Y058;国家自然科学基金项目31160439;云南省应用基础研究计划面上项目2010ZC241;云南农业大学农科专业基础实验教学中心创新基金项目NKZX2011CX044

在线出版日期：2013-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2327-2332