核黄素合酶基因RNAi表达载体的构建

摘要：

根据拟南芥RS基因的编码序列设计引物,利用PCR技术从pGADT7-RS重组质粒上扩增到RS基因编码区476 bp片段.利用双链RNA介导的基因沉默技术,构建RS基因沉默表达载体,为进一步研究该基因在植物与蛋白激发子HpaGx(oo)互作中的功能及其作用机制奠定基础.首先将RS基因片段连接到pUCm-T载体上,用Pst I/BamH I和Pst I/Xho I分别对pUCm-PS重组载体进行酶切,得到2个RS基因片段;先后将其连接到用相应限制酶酶切的pBSSK-in载体上,构建成pBSSK-PS-in-RS重组载体,该重组载体中的2个RS片段大小一致,反向重复;最后用Sac I/KpnI酶切pBSSK-RS-in-RS载体得到RS-intron-RS片段,连入表达载体pCAMBIA1301中,构建成该基因的沉默表达载体.

关键词：RS基因、基因沉默、载体构建

所属期刊栏目：25

分类号：S637(蔬菜园艺)

资助基金：廊坊师范学院科学研究资助项目LSSZB201002

在线出版日期：2012-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：997-1000