用正交设计法优化辣椒ISSR-PCR反应体系

摘要：

采用正交设计L16(45)对辣椒ISSR-PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物浓度)在4水平上进行优化试验.结果表明,最佳反应体系为:在25μl总反应体系中,含1×PCR缓冲液、2.0 mmol Mg2+、1.5 unit Taq DNA聚合酶、0.25 mmoldNTP、0.48 μmol引物、120ng模扳DNA.扩增程序为:95℃预变性5 min；94℃变性45 s,51℃退火1 min,72℃延伸2min,进行38个循环；最后72℃延伸10 min.新优化的辣椒ISSR-PCR反应体系和程序有很好的重复性和稳定性.此研究为今后利用ISSR技术对辣椒进行种质资源分类、遗传图谱构建和基因定位提供了一个较理想的应用方案.

关键词：辣椒、ISSR、反应体系、正交设计、优化

所属期刊栏目：24

分类号：S641.3

资助基金：云南省自然科学基金2008CD136

在线出版日期：2011-12-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1034-1038