感染与未感染桃拉病毒凡纳宾对虾基因差异表达文库的构建

摘要：

为了寻找对虾抗桃拉病毒(TSV)相关基因信息,研究对虾抗TSV分子机理.应用抑制性差减杂交(SSH)技术,构建TSV感染后存活凡纳宾对虾与未感染凡纳宾对虾的基因差异表达文库,并通过相对定量PCR以及斑点杂交分别对SSH的效率以及文库的可靠性进行验证.结果表明,SPR凡纳宾对虾和SPF凡纳宾对虾攻毒后的死亡率分别为12 %和90 %;在SSH系统中,相对于未进行杂交的cDNA样品,杂交后的cDNA样品的β-肌动蛋白(β-actin)几乎没有被检测出,说明SSH操作系统是高效率的.通过文库构建则获得正负2个文库,其中正库含阳性克隆1051个,负库含阳性克隆580个;而经斑点杂交验证,共获差异表达克隆321个,其中攻毒组高表达克隆270个,未攻毒组高表达克隆51个.可见,SPR凡纳宾对虾具有较强的抗TSV能力,以之为基础构建的对虾基因差异表达文库具有高度的可靠性,由文库得到的基因信息对获取对虾抗(TSV)相关基因具有潜在的应用价值.

关键词：凡纳宾对虾、桃拉病毒、基因文库、抑制性差减杂交

所属期刊栏目：23

分类号：S946.1(水产保护学)

资助基金：现代农业产业技术体系建设专项资金资助;广西自治区科技计划项目桂科基0639035

在线出版日期：2010-05-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：234-238