10.3969/j.issn.1001-4829.2010.01.047
牛轮状病毒VP4基因与LTB基因的融合表达及免疫原性研究
PCR扩增轮状病毒VP4基因和大肠杆菌LTB基因编码区,将其克隆至pET32a载体上,构建pET32a-VP4-LTB质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),PCR、酶切鉴定后进一步测序,测序结果表明融合基因片段由2637 bp组成,为编码879个氨基酸残基的多肽.经IPTG诱导和SDS-PAGE检测发现表达产物分子量约为118.9 KD,以包涵体的形式存在.融合蛋白经镍离子螯合次氨基三乙酸(Ni-NTA)亲和层析纯化后免疫小鼠,结果所产生的抗体效价高于单独VP4蛋白的免疫结果但差异不显著(P>0.5),但与对照组相比差异显著.表明所表达的融合蛋白具有较好的免疫原性,为研制牛轮状病毒亚单位疫苗奠定了基础.
牛轮状病毒、融合基因、原核表达、免疫原性
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S851.34~+7.1(动物医学(兽医学))
山东省农科院青年基金项目2007YQN018;山东省农科院产业开发项目2007-013;山东省农科院"杰出人才"项目;现代农业产业技术体系nycytx-0107
2010-05-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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