调控SUV39H1/2 对水牛乳腺细胞增殖及STAT5a表达的影响

摘要：

为了解SUV39 H1/2 基因对水牛STAT5a 基因表达的调控作用,首先克隆不同长度水牛STAT5a 启动子区,采用双荧光素酶方法检测启动子活性.利用SUV39 H1/2-shRNA慢病毒感染水牛乳腺上皮细胞,检测细胞增殖及相关基因表达变化,并分析DNA甲基化水平.结果显示:克隆获得的 2190 bp,355 bp,417 bp STAT5a 启动子片段均具有活性,2190 bp片段活性显著高于其他两个片段(p<0.05),2190 bp启动子区存在sp1,p300,p53,NF-kB 等转录结合位点.下调SUV39 H1/2 基因表达后,乳腺上皮细胞周期阻滞在 S期,G0/G1 期细胞比例无显著差异,G2 期比例显著减少(p<0.05).qRT-PCR结果显示,抑制SUV39 H1/2 基因表达使乳腺上皮细胞分化及乳蛋白合成相关基因STAT5a,mTOR,且乳脂合成相关基因 srebp1,fabp3 表达水平均显著降低(p<0.05);STAT5a 启动子区甲基化程度为 31.5％,高于对照组 15.5％.结果表明:抑制SUV39 H1/2 基因表达能够促进水牛乳腺上皮细胞增殖;SUV39 H1/2 基因可能通过调控STAT5a 启动子甲基化水平,进而调控乳腺上皮细胞增殖分化、乳汁和乳蛋白合成相关基因表达.

关键词：水牛、乳腺上皮细胞、细胞增殖、STAT5a、启动子甲基化

所属期刊栏目：45

分类号：S823.8+3(家畜)

资助基金：广西自然科学基金项目;亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室自主研究课题

在线出版日期：2023-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：126-135