豌豆蚜可溶型海藻糖酶基因克隆及RNA干扰效应

摘要：

为了明确豌豆蚜可溶型海藻糖酶基因在基于RNA干扰技术的害虫防治中的应用潜力,该研究根据豌豆蚜基因组数据克隆获得了可溶型海藻糖酶基因(ApTre-1),通过在线软件对其氨基酸序列进行了分析,并利用实时荧光定量PCR技术分析了ApTre-1基因在豌豆蚜不同龄期的表达水平变化;设计合成了2种dsRNA片段(dsApTre-1-1和dsApTre-1-2),采用显微注射法测定了其对靶基因ApTre-1的RNA干扰效率;选取干扰效率较高的dsRNA片段与人工饲料混合后,进一步采用饲喂法测定其对豌豆蚜生长的影响和致死效应.研究结果表明:豌豆蚜ApTre-1基因的开放阅读框全长为1770 bp,编码589个氨基酸,在DNA水平上由9个外显子和8个内含子组成;ApTre-1蛋白的N端含有一段长为20 aa的信号肽序列,具有典型的昆虫海藻糖酶标签序列.荧光定量PCR检测结果表明:ApTre-1基因在豌豆蚜1龄若虫阶段的相对表达量最高.显微注射法测定结果表明:dsApTre-1-1对靶基因ApTre-1具有相对较高的干扰效率.进一步采用饲喂法测定结果表明:豌豆蚜取食dsApTre-1-1后,靶基因表达水平显著下降,豌豆蚜的生长也受到较为明显的抑制,但死亡率较低(17.5％).

关键词：豌豆蚜、海藻糖酶基因、表达水平、RNA干扰技术、害虫防治

所属期刊栏目：44

分类号：S435.24(病虫害及其防治)

资助基金：国家重点研发计划;陕西省重点研发计划项目;中央高校基本科研业务费专项

在线出版日期：2022-12-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：88-98